第二篇　皮肤性病学基本操作技能

第三章　皮肤性病临床检验检查技术

第一节　病理检查

一、常规组织病理检查

（一）适应证

为了解疾病的发生、发展、转归、治疗方法的选择等，几乎各种皮肤病均可行组织病理检查。就诊断目的而言，皮肤组织病理对肿瘤、某些皮肤变性（如皮肤淀粉样变性）、某些病毒性皮肤病（如传染性软疣）等具有诊断价值，即一级诊断。对许多皮肤病需结合临床特点方可诊断，即二级诊断，如符合扁平苔藓、符合天疱疮、符合寻常狼疮等。对一些临床鉴别困难、病理特点又不明显者，则用三级诊断，如银屑病样皮炎、海绵水肿性皮炎等。若一些皮损的临床及病理改变完全无规律可循时，则只进行描述而不作出诊断，为四级诊断。

（二）禁忌证

患有严重出血性疾病的患者应避免皮肤病理检查；严重瘢痕体质者（尤其是特殊部位）应慎重取材。

（三）步骤

1.皮损选择

在选取皮肤组织活检时，一般应选择充分发育的损害，因为早期病变常为非特异性，而晚期病变大多处于恢复或变性、坏死阶段。疱疹性皮肤病及含有病原体的损害最好选新鲜皮损，避免继发性损害。环状损害应选择活动边缘部分。结节性损害切取标本时应达到足够深度。此外，取材时应包括一小部分正常组织，以便与病变组织对照。

2.取材方法

手术切取法适用于各种大小要求的标本，最为常用。切取时应注意切缘锐利整齐，切口方向尽量与皮纹一致，两端对齐，足够深、足够大，避免重切，夹持时尽量位于组织两端，以避免夹坏组织影响观察。环钻只适用于较小损害，或病变限于浅表处，或手术切取有困难者。削切法很少采用，可用于脂溢性角化病等浅表皮损。

3.标本处理

切下的组织应立即放入固定液中。常用固定液为10%甲醛，肥大细胞增生症、痛风等需用95%乙醇固定。若需留免疫病理标本，应将组织置于4℃冷生理盐水纱布中尽快送包埋处理。若需留电镜标本，应立即将标本用刀片分割，将标本移至滴有4℃电镜固定液的蜡块或玻璃板上，以眼科有齿镊夹持，用剃须刀片分割成约1mm×1mm×1mm大小，挑选2～5块放入4℃电镜固定液中送检。若需留细菌或真菌培养标本，应严格无菌操作，优先留取培养标本后再处理其他标本。

（四）注意事项

1.活检术后避免接触水，尽量减少出汗。

2.如有出血或感染，应给予紧急处理，或到医院就诊。

二、免疫病理检查

（一）适应证

大疱性皮肤病、结缔组织病、血管炎等免疫性皮肤病，某些病原体检测及肿瘤的鉴别诊断。

（二）禁忌证

严重出血性疾病应避免皮肤取材和直接免疫荧光检查。

（三）步骤

1.标本取材

同常规组织病理检查。直接免疫荧光检查，需将皮肤标本用湿润的生理盐水纱布包裹，4℃下尽快送检。多数免疫酶标法可用普通病理方法制备的石蜡包埋的组织块为检验材料。

2.直接免疫荧光法（direct immunofluorescence，DIF）

主要用于检测病变组织中存在的抗体或补体。将冷冻切片组织固定于玻片上，滴加荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体或抗C3抗体等，经孵育、清洗等处理后，置于荧光显微镜下观察。若组织中有人免疫球蛋白或C3沉积，则荧光抗体与之结合呈现荧光。

3.间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）

主要用于检测血清中存在循环的自身抗体，并可做抗体滴度分析。底物取自正常人皮肤或动物组织（如鼠肝切片），将患者血清滴于底物上，再滴加荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体等，荧光显微镜下观察。若血清中存在循环的特异抗体，荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体与结合到底物上的抗体结合，呈现荧光。

4.免疫酶标记法

有多种不同的检测系统和方法。机制与间接免疫荧光法类同，但显示系统为可催化成色反应的辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等。主要标记细胞的某种特异性成分，用于肿瘤的鉴别诊断。

（四）注意事项

DIF取材注意事项同皮肤组织病理检查。