第四节　过敏原检查法

一、概述

变应性鼻炎常用的变应原检测方法包括体内试验和体外试验，前者包括皮肤点刺试验（skin prick test，SPT）和鼻腔黏膜激发试验（nasal provocation test，NPT），后者包括血清特异性免疫球蛋白E（specific immunoglobulin E，sIgE）检测。

SPT是将少量高度纯化的致敏原滴在患者前臂皮肤上，然后用一次性点刺针轻轻刺入皮肤表层。应在试验后15～20分钟进行结果判定，即反应达到高峰时测量风团直径。当阴性对照完全阴性时，阳性对照和过敏原点刺部位风团直径 ≥ 3mm即为阳性。

NPT是指将变应原在标准控制的条件下直接作用于鼻腔黏膜，以观察变应原是否可激发出鼻腔黏膜的Ⅰ型超敏反应，表现为打喷嚏、鼻痒、鼻塞、流涕及眼部等症状。目前最常用抗原吸入法（粉剂）或滴入法（液体）进行检测，接触抗原15～20分钟后，通过主观评分、客观评估进行结果判定，该方法是诊断变应性鼻炎并确定变应原的“金标准”。

sIgE检测是过敏原检测手段之一，对于发现过敏原具有重要指导意义。患者吸入、摄入或接触含有致敏成分的物质后，触发机体发生Ⅰ型超敏反应，B细胞迅速产生过量IgE类免疫球蛋白。检测方法主要包括放射免疫吸附试验（radioimmunoadsorbent test，RIST）、酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）、间接血凝试验、化学发光分析和免疫印迹法等。

二、操作规范流程

（一）适应证

1.SPT适应证为过敏原特异性IgE介导的疾病，包括变应性鼻炎、变应性结膜炎和/或变应性哮喘等。

2.NPT适应证为多种变应原呈阳性结果的变应性鼻炎患者，为确认特定变应原的临床相关性；当患者病史与SPT和/或sIgE结果不吻合或诊断困难时，需用NPT进行判别；变应原特异性免疫治疗前后，用于确定鼻腔对变应原的反应程度和疗效评估；评估治疗药物的有效性；变应原性呼吸系统疾病的病因学研究。

3.sIgE检测适用于各型荨麻疹、特应性皮炎、变应性鼻炎和哮喘等。

（二）禁忌证

1.SPT禁忌证

①绝对禁忌证：重症哮喘经规范药物治疗后，肺功能评估第一秒用力呼气量（forced expiratory volume in first second，FEV_l）＜ 70%；系统性自身免疫性疾病发作期。②相对禁忌证：部分控制哮喘；局部或全身正在使用受体阻滞剂；冠心病等严重心血管疾病；系统性自身免疫性疾病缓解期；严重的精神疾病；依从性差；原发性或继发性免疫缺陷疾病；发生过针对过敏原特异性免疫治疗的严重全身反应；应尽量避免妊娠期进行点刺试验。

2.NPT禁忌证

①急性细菌性或病毒性鼻-鼻窦炎发作期；既往有严重过敏反应史；哮喘未控制期或严重阻塞性肺疾病；禁用肾上腺素的心肺疾病患者；其他严重的系统性疾病，如恶性肿瘤、自身免疫性疾病；妊娠。②小于5岁儿童为其相对禁忌证。

3.sIgE检测禁忌证

sIgE检测适用于任何年龄的患者，且不受皮肤条件的限制。

（三）操作前准备

1.SPT检查前准备

点刺液需2～8℃冷藏保存，准备好一次性点刺针及消毒乙醇。检查前3天须停用抗组胺药物，1天前停用激素，并且不能在点刺部位皮肤使用激素类软膏。询问有无过敏性休克、严重过敏反应等病史，有无晕针及皮肤划痕症。签署检查知情同意书。

2.NPT检查前准备

患者应处于无症状期，停用影响鼻黏膜反应的药物。口服抗组胺药停药48小时至1～2周，鼻用抗组胺药停药4～5天，鼻用激素停药48～72小时，口服激素停药2～3周，色甘酸钠停药1～3周，鼻减充血剂停药2天，三环类抗抑郁药停药2～3周，非甾体抗炎药停药1周，利血平类、可乐定类降压药停药3周。检查前24～48小时应避免烟酒。病毒或细菌性呼吸道感染4周后进行。鼻部手术后应至少间隔6～8周再进行NPT。完成SPT或血清sIgE检查，前鼻镜或鼻内镜检查评估鼻黏膜状况。鼻中隔穿孔或严重鼻塞的患者不建议行NPT。检查室内温度保持在20～22℃，湿度保持在40%～60%，患者等候20～30分钟以适应环境。签署检查知情同意书。

3.sIgE检查前准备

静脉穿刺针，一次性血清采样管。

（四）操作步骤

1.SPT检查步骤

（1）核对医嘱，询问患者用药情况及过敏史。嘱患者面对操作者，伸出前臂屈侧，局部乙醇消毒。

（2）将1滴变应原溶液滴在前臂屈侧皮肤上，液滴间距2cm以上，然后将点刺针垂直放在变应原液滴中，仅用示指顶住针尾，向下轻压刺破皮肤后立即将针提起弃之。每个过敏原一个点刺针头。

（3）2～3分钟后将变应原液滴轻轻擦干，15～20分钟时观察皮肤风团反应。

（4）结果判断（图1-4-1）：①阳性对照皮肤试验应呈阳性反应，如为阴性反应，说明变应原皮试结果不可靠；如阴性对照和变应原均出现风团和红晕反应，亦不具有临床意义。②可采用皮肤指数（skin index，SI）评价SPT的反应强度，分别测量过敏原和阳性对照组的最长风团直径及其垂直直径，尽量避开伪足，计算出平均直径，将过敏原平均直径除以阳性对照平均直径，获得 SI值。分四个等级：+ 为 0.3 ≤ SI＜0.5，++ 为 0.5 ≤ SI＜1，+++ 为 1 ≤ SI＜2，++++ 为 SI＞2。

2.NPT检查步骤

（1）基础评估：未使用任何试剂前，对患者进行主观症状评分及客观通气功能评分。

（2）对照液激发试验：向鼻腔喷入100μl生理盐水，排除鼻腔非特异性高反应。

（3）变应原激发试验：将100μl变应原标准液喷入鼻腔，或将标准液滴在1cm2滤纸片上，将滤纸片贴在下鼻甲黏膜表面15～20分钟后，再次评估患者的主观症状评分及客观通气评分。从变应原标准液的1：1 000稀释液开始试验，10～100倍浓度递增直到获得阳性结果，或直到没有显著反应的最高浓度时结束试验。

（4）为了避免试验之间的干扰效应，建议每次只检测1种变应原，两种不同变应原的检测应至少间隔1周。

3.sIgE检测步骤（ELISA）

抗体1：100倍稀释后按100μl/孔包被于96孔酶标板中，双复孔设对照，置4℃冰箱中备用。包被酶标板2天封板后加入待测血清（1：5倍稀释）100μl/孔。置4℃冰箱24小时后取出。洗涤3次，加入HRP-IgE 100μl/孔，置4℃冰箱中24小时后取出，洗涤3次，加入显色液100μl/孔，置37℃恒温箱中20分钟后加终止液50μl/孔。酶标仪上490nm处读取结果，并计算浓度。

（五）操作后处理

SPT检测后需清水清洗点刺部位，观察30分钟方可离开，以防发生过敏反应。

（六）并发症及处理

1.晕针

主要表现为突发精神疲倦、头晕目眩、面色苍白、恶心欲吐、多汗心悸、四肢发凉、大小便失禁，甚至神志昏迷。预防措施：做好解释工作，消除恐惧心理；采用舒适体位，手法轻柔；对身体不适者，休息后再针刺。轻者抬高双腿，头部放低，静卧片刻，给予热水或糖水。重者则需要配合人工呼吸，心脏按压及注射强心针。

2.过敏

出现皮肤红疹、瘙痒、疼痛，甚至眼睑和嘴唇肿胀等过敏性皮炎表现；严重者可出现面色苍白、皮肤黏膜潮红，血压下降、呼吸困难，甚至休克、意识丧失等。预防处理措施：清洗过敏液，全身口服抗组胺药物，严重者可给予糖皮质激素，局部可予以炉甘石洗剂。出现休克症状应立即予以抢救，予以吸氧，皮下注射肾上腺素，呼吸抑制时予以人工呼吸，心脏停搏时立即行心肺复苏。

（七）注意事项

1.学习有关过敏原检查的相关理论原理，包括过敏原检查的分类、适应证和禁忌证；掌握并发症的表现及处理。

2.点刺时需待消毒乙醇自然风干，不可擦拭或吹干。相邻点刺点距离保持2cm以上以免风团融合。点刺针需确保刺破皮肤后立即提起，不能刺太浅或者太深。不同点刺液必须更换点刺针，避免交叉污染。

3.NPT检查前需查看鼻腔情况，哮喘发作时不可进行。检查时每次接触的过敏原液体应保持同等剂量，吸入或接触致敏原浸液后至少应观察30分钟，有条件者应观察24小时，便于发现迟缓反应和双相反应。如果出现较严重反应时可用稀释的去甲肾上腺液进行鼻冲洗，必要时按变态反应性鼻炎急性发病给药。

（八）相关知识

SPT、血清sIgE检测和NPT之间不具备共同的生物和临床关联，无法相互替代。SPT方便、简单、生物相关性好、重复性高，操作简单快速，成本低，灵敏度高。sIgE检测不受药物影响，灵敏度高，但其费用高，且出结果慢。NPT检测可靠性好，最能反映个体与致敏原的临床关联，但只能单个测试，且存在一定风险。过敏原检测阳性结果并不一定意味着症状是由IgE介导的变态反应引起的，因此最重要的是判断检测结果与病史的相关性。阳性结果可以帮助确定变应原，而阴性结果则可以排除该变应原。皮肤反应强烈并不意味着病情严重，只是代表受试者皮肤点刺部位的敏感程度更强。

三、规范操作评估表（表1-4-1）

四、常见操作错误及分析

1.SPT假阳性

应先排除检测试剂被污染，查看阴性对照情况。皮肤划痕症及压力性荨麻疹也可出现假阳性。同时注意点刺时点刺针每次都要更换，且点刺部位间距要大于2cm，以免风团相互融合难以判断。

2.SPT假阴性

排除抗组胺药及激素影响，另外可能的原因有点刺针未突破表皮，试剂未进入皮肤；点刺试剂失效也可导致。

3.NPT假阴性

可能与停药时间不足相关，另外与鼻息肉、检查时鼻塞、试剂非标准化或过期等相关。

4.NPT假阳性

最常见的原因为鼻周期导致鼻部通气变化；其余可能，如鼻腔黏膜处于非特异性高反应状态、试剂被污染等。

五、相关知识测试题

（王风君）